一次性口罩佩戴的时间取决于微生物聚集和增殖的时间，医学上建议最好不要超过4个小时，否则微生物等有可能会渗透入口罩内表面导致细菌超标。但是在口罩资源不足的情况下，如果防护效果比较好的，还是可以适当延长使用时间。
一次性口罩属于一次性消耗品，特别是用于防治病毒、细菌、真菌等病原体在空气中传播导致的传染病时。一次性口罩不可以长久使用，否则病原体可能会在口罩表面聚集繁殖，最终污染口罩的内面而导致防病作用降低。