使用艾滋病试纸需要进行多次检测，其主要与两方面因素有关。
首先，艾滋病感染存在窗口期，如在窗口期使用艾滋病试纸进行检测，则检查结果可以为阴性，如以单次检查结果作为诊断依据，容易导致漏诊。一般建议单次检查为阴性情况下，需要间隔两周进行第2次检查，如存在明确艾滋病病毒暴露情况或合并病毒感染非特异性体征，则需要多次检查。
其次，艾滋病试纸使用方面，部分人群以自我测试方式进行，如存在使用操作不规范可导致漏诊，故需多次进行检测。