红霉素眼膏是大环内酯类抗生素眼膏，在使用时一般是涂于结膜囊内。使用前先清洗双手，用双手将上、下眼睑撑开，另一手挤压眼膏，将挤出的前1cm药膏丢弃，将眼膏挤入结膜囊内，再阖上上、下眼睑。
冬天时若红霉素眼膏的膏体较硬，可以在用药前将眼膏握于手中半小时，此时膏体相对较软，易于上药。由于红霉素眼膏较粘稠，上药后眼膏糊住上下眼睑，患者有明显的视物模糊，影响工作和学习。在病情允许的前提下，可以每晚用1次。