用于测定肌酸激酶的方法不同，其正常值也不尽相同。目前使用最广泛的是酶偶联反应测定法，男性正常值在38~174U/L，而女性略低为26~140U/L。人体骨骼肌、心肌以及平滑肌中肌酸激酶含量最多，脑组织、胃肠道、肺和肾当中也含有少量。
临床上肌酸激酶测定主要用于骨骼肌疾病及心肌疾病的诊断，比如皮肌炎、肌营养不良和心肌梗死、病毒性心肌炎、心包炎等。除此以外脑血管意外发生时也会升高。需要注意运动也可导致肌酸激酶升高。