睾酮的生理作用主要包括以下几个方面，
第一，对生理系统的影响，阴茎，附睾，精囊，前列腺的生长和功能有赖于睾酮，并能促使阴囊生长和阴囊皮肤色素沉着，增加精液内果糖，枸橼酸和酸性磷酸酶，促使睾丸本身曲细精管发育和精子发生，保证性欲和性功能的完成。
第二，对第二性征的影响，睾酮可增厚皮肤，增加皮肤循环和色素沉着，促使阴毛生长，促进男子第二性征发育，包括胡须，喉结发育，皮脂腺分泌旺盛，声调低沉，骨骼肌肉发达，骨盆狭小等特征。
第三，对新陈代谢的影响，增加蛋白质合成，促进水与钠潴留，提高血浆内低密度脂蛋白浓度，促进骨髓造血功能，增加红细胞和血红蛋白的数量。