注射乙肝疫苗第二针在注射第一针之后1个月进行注射第二针。乙肝疫苗的注射要注射三针，分别在第一针注射后第1个月与第6个月后分别注射第二、第三针。
注射完乙肝疫苗后可以检测一下乙肝表面抗体的滴度。如果其滴度高于10，说明已经完全对乙肝病毒具有免疫力，不会再感染乙肝病毒。如果其数值低于10，则建议再次接种一次乙肝疫苗，使乙肝表面抗体滴度上升到10以上。
但是，也有少部分患者注射乙肝疫苗后始终都不能出现乙肝表面抗体阳性，这类患者通常免疫反应低下。